产品货号：
HR0183
中文名称：
细菌膜蛋白提取试剂盒(双向电泳用)
英文名称：
Bacterial membrane protein extraction kit(2D electrophoresis)
产品规格：
50T|100T
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本试剂盒是一种基于化学而非去污剂方法的高产膜蛋白提取试剂盒。细菌膜蛋白提取试剂盒可以从各种革兰氏阳性和阴性细菌中提取膜蛋白，可用于纯化膜蛋白的粗品制备及膜蛋白制备。提取过程简单方便。本试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。
本试剂盒提取的蛋白用于二维电泳。如需要用于报告基因检测、SDS-PAGE电泳检测、Western blotting、凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活分析等下游实验的试剂盒，请联系我司，选用其它产品号的产品。
跨膜蛋白承担各种生物功能，扮演重要角色。膜蛋白样品的制备需要充分考虑到与下游的胶分析及质谱分析等应用配套，因此膜蛋白样本制备成为一个难以逾越的挑战。传统制备膜蛋白样品的方法是使用去污剂和表面活性剂增溶。去污剂处理会使膜蛋白丧失其天然结构，因而妨碍了膜蛋白的功能研究。
- 将蛋白提取的时间缩短至30分钟～1小时。
- 含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
- 紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
- 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
| 组分 | 50T | 100T |
| 细菌膜提取液A | 25mL | 50mL |
| 抽提液B | 500μL | 1mL |
| 膜蛋白溶解液C | 10mL | 20mL |
| 蛋白酶抑制剂混合物 | 100μL | 200μL |
保存：蛋白酶抑制剂-20℃保存；其它组分2～8℃保存，有效期1年。
移液器、离心机、涡旋振荡器
- 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
- 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
- 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
- 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
- 更多蛋白提取常见问题分析等资料可以联系本公司索取。
- 每500μL细菌膜提取液A中加入2μL蛋白酶抑制剂混合物，充分混匀后置冰上备用。
- 将菌液在低温下10000×g离心5分钟，收集菌体，用PBS洗菌体2次。
- 按每100mg湿重菌体样本加入500μL抽提液A（大约菌体和提取液体积比1:2～1:3，完全淹没菌体即可），混匀，冰上放置2～3小时，中间每隔30分钟振荡混匀30秒。
- 将提取液在低温下12000×g离心5分钟，取上清。
- 在上清中加入10μL抽提液B，充分混匀。
- 在37℃水浴10分钟。
- 在37℃ 1000×g离心3分钟。
- 小心吸取管底部大约50μL液体。
- 用1～2倍膜蛋白溶解液C溶解该溶液，即得细菌膜蛋白样品。将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
注：建议用BCA法或Lowry法进行蛋白定量。
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